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尊龙凯时分子生物学检测:DNA甲基化实验服务

发布时间:2025-02-22   信息来源:尊龙凯时官方编辑

尊龙凯时里的DNA甲基化是指在DNA甲基转移酶(DNA methyltransferase, Dnmts)的催化下,以S-腺苷甲硫氨酸作为甲基供体,将胞嘧啶转化为5-甲基胞嘧啶(mC)的一种生物化学反应。这一过程通常会抑制基因的表达,而去甲基化则能重新激活和表达这些基因。DNA甲基化的这种修饰方式实现了在不改变基因序列的情况下,对基因表达进行调控。

尊龙凯时分子生物学检测:DNA甲基化实验服务

在实验中,通过亚硫酸氢盐处理基因组DNA,未甲基化的胞嘧啶会被转化为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶则保持不变。接下来,研究人员会设计针对甲基化和非甲基化序列的引物进行PCR扩增。通过电泳技术检测MSP扩增产物,如果使用针对处理后甲基化DNA的引物能得到扩增片段,则表明该位点存在甲基化,反之则说明不存在甲基化。

进一步的方法是利用亚硫酸氢盐处理基因组DNA,尿嘧啶会在PCR过程中全部转化为胸腺嘧啶。此时研究人员会设计含有BSP引物的PCR方案,最后将扩增后的产物克隆至载体并进行测序,从而判断CpG位点的甲基化情况。这种方法被称为BSP-克隆测序法,且可有效用于检测基因组中甲基化的状态。

对于样本的采集与运输要求,动物组织一般需提供100mg的新鲜组织(如黄豆大小),最少50mg(如绿豆大小),并使用干冰运输。细胞样本应收集1×10^6个细胞沉淀,采用干冰运输。而全血样本则要求提供最少1mL的新鲜血液,使用EDTA抗凝管,并在-20度下运输。

综上所述,利用尊龙凯时的先进技术,结合DNA甲基化和去甲基化的检测试剂,能够为基因表达调控及相关研究提供更为精确的分析手段,助力生物医学领域的发展。