本试剂盒仅限于科学研究用途，严禁用于医学诊断。本文将介绍人巨噬细胞炎性蛋白5 (MIP-5) 的ELISA试剂盒的使用原理和具体操作。

检测原理

本试剂盒采用双抗体一步夹心法的酶联免疫吸附试验（ELISA）。实验过程中，首先将样本、标准品及HRP标记的检测抗体依次加入预先固定有adropin（AD）抗体的微孔中。经过适当温育后，进行彻底的洗涤步骤。利用底物TMB显色，在过氧化物酶的催化下，TMB由蓝色转化为最终黄色，颜色的深浅与样品中的adropin（AD）浓度呈正相关。随后，使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），并计算样品的浓度。

样品收集、处理及保存方法

1. 血清：需使用无热源和内毒素的试管，操作时避免任何细胞刺激。收集血液后，进行3000转离心10分钟，迅速并小心地分离血清与红细胞。

2. 血浆：采用EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂，再进行3000转离心30分钟以获取上清液。

3. 细胞上清液：将样品进行3000转离心10分钟，以去除颗粒及聚合物。

4. 组织匀浆：将组织与适量生理盐水混合并捣碎，然后进行3000转离心10分钟以提取上清液。

5. 保存：若样本未能及时检测，请将其分装为一次用量并储存于-20℃，避免反复冻融。解冻时请在室温下操作，确保样本彻底均匀解冻。

操作注意事项

本试剂盒包含标准品（S0-S5），其浓度依次为：0、25、50、100、200、400 pg/mL。

试剂的准备：20×洗涤缓冲液需用蒸馏水按1:20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

结果判断

绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度为横坐标，对应的OD值为纵坐标，绘制出标准品的线性回归曲线，并按照曲线方程计算各样本的浓度值。

注意：本试剂盒具有特定性能，使用前请仔细阅读所有使用说明，并遵循操作规范。同时，推荐使用尊龙凯时品牌的试剂以确保实验的准确性和可靠性。